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96孔板鋪板的小技巧,您知道多少?
點(diǎn)擊次數(shù):5249 更新時(shí)間:2022-03-24

      您是怎樣對(duì)96孔板進(jìn)行鋪板的?當(dāng)細(xì)胞用96孔板接種時(shí),細(xì)胞經(jīng)常是不均勻分布。第二天就會(huì)發(fā)現(xiàn)有些地方出現(xiàn)堆積性生長(zhǎng),而還有不少地方細(xì)胞則很稀疏,細(xì)胞密集的地方因細(xì)胞與細(xì)胞之間的接觸抑制影響細(xì)胞的生長(zhǎng),這樣就很難評(píng)價(jià)干預(yù)因素對(duì)細(xì)胞的作用。因此,將96孔板種均勻也是進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)的前提,現(xiàn)將以前用的老辦法和最后用的新方法比較一下,以讓大家看看各自優(yōu)缺。

  1、老方法:植板后,用手拿起96孔板,左右搖動(dòng),然后來回?fù)u動(dòng)幾次,但這種方法通常在2-3個(gè)細(xì)胞的5口井中分布不均勻。 在大多數(shù)情況下,中間的孔會(huì)出現(xiàn)成堆的分布,會(huì)讓人感到一陣麻煩。 再一次,看到一位老師將電路板放在振動(dòng)器上并搖動(dòng)幾分鐘。 結(jié)果更糟。 細(xì)胞都在中間。

  通常,會(huì)在96孔板的每個(gè)孔上,加入100微升的細(xì)胞懸浮液。把它從左邊加到洞底。加入一半板材后,與未加入的細(xì)胞懸浮液混合,然后繼續(xù)加入剩余的一半板材。蓋上蓋子后,用左手輕輕握住木板的左邊,然后用右手輕拍木板的右邊緣。注意力集中在力量上(通常敲擊它三次)。太多或太多次會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞堆積。順時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)盤子(逆時(shí)針方向不好) ,將剩下的三面逐一拍打,靜置5分鐘左右,然后放入37度的培養(yǎng)箱中。

  2、新方法:這種方法是非常好,非常均勻播種。使用等速吸引吸取細(xì)胞,然后吸移嘴對(duì)孔(注意尖不接觸孔槍頭底部)的側(cè)壁上,然后再慢慢敲除細(xì)胞吸管定植后,不要搖晃板,它只是可以直接在顯微鏡下被放置,這個(gè)方法可以被說成是有效的。

  補(bǔ)充:從6孔板到96孔板,細(xì)胞應(yīng)均勻分布分散。用培養(yǎng)基進(jìn)行稀釋細(xì)胞,然后將培養(yǎng)板放置在適當(dāng)?shù)奈恢?。添加一個(gè)細(xì)胞時(shí)和之后,請(qǐng)勿移動(dòng)能力培養(yǎng)板;如果在空氣中沒有介質(zhì)吹入,但是不要移動(dòng)培養(yǎng)板,加入細(xì)胞后,靜置20-30分鐘,然后可以將其移入培養(yǎng)箱。這樣,細(xì)胞結(jié)構(gòu)通常具有均勻生長(zhǎng)。當(dāng)然,前提是細(xì)胞消化系統(tǒng)良好。

 

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